从基质代谢角度探讨扶正化瘀方抗心肌纤维化的细胞分子机制

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摘要目的通过观察扶正化瘀方（FZHY）对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的心肌成纤维细胞（CFs）细胞外基质（ECM）代谢的影响，探讨其抗心肌纤维化（MF）的分子机制。方法差速贴壁法提取乳鼠原代CFs，传代培养。将细胞分为3组，每组6个样本，分别加入2% FBS-DMEM（空白对照组），1×10-7mol/L AngⅡ（AngⅡ组），1×10-7mol/L AngⅡ+100 μg/mL FZHY（FZHY组）。干预48 h后，采用ELISA法检测Ⅰ型胶原（ColⅠ）、ColⅢ、基质金属蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2的分泌情况；采用实时荧光定量PCR法检测ColⅠ、ColⅢ、MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2 mRNA的表达情况。结果与空白对照组比较，AngⅡ组ColⅠ、ColⅢ含量及mRNA的表达增加（P ＜ 0.01）；与AngⅡ组比较，FZHY组ColⅠ、ColⅢ含量及其mRNA表达下降（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01）。与空白对照组比较，AngⅡ组MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2及其mRNA表达增加（P ＜ 0.05），MMP-2/TIMP-2和MMP-9/TIMP-1有降低趋势；与AngⅡ组比较，FZHY组MMP-2、MMP-9、TIMP-1和TIMP-2及其mRNA表达下降，MMP-2/TIMP-2降低（P ＜ 0.05或P ＜ 0.01），MMP-9/TIMP-1有降低趋势，但差异无统计学意义（P ＞ 0.05）。结论 FZHY可减少CFs ColⅠ、ColⅢ的表达，其机制可能与下调MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2及其mRNA表达，降低MMP-2/TIMP-2、MMP-9/TIMP-1比值，调控ECM代谢有关。

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	朱珂1 娄利霞1 祁轶斐1
	2 高永红1 李春红1 国倩倩1 吴丹丹1 张冬梅1

关键词 ：扶正化瘀方, 心肌纤维化, 心肌成纤维细胞, 细胞外基质, 金属基质蛋白酶

Abstract：Objective To observe the effect of Fuzheng Huayu Recipe (FZHY) on the extracellular matrix (ECM) metabolism of rat cardiac fibroblasts (CFs) induced by angiotensin Ⅱ (Ang Ⅱ), and to explore the mechanism of FZHY in treating myocardial fibrosis. Methods Differential adherent method was used to extract primary CFs from neonatal rats and subculture them. Cells can be divided into three groups, each group of 6 samples, add 2% FBS-DMEM (blank control group), 1 × 10-7 mol/L Ang Ⅱ (Ang Ⅱ group), 1 × 10-7 mol/L Ang Ⅱ + 100 μg/mL FZHY (FZHY group). Intervention after 48 h, collagentype Ⅰ(ColⅠ), ColⅢ, matrix metalloproteinases (MMP)-2, MMP-9 and TIMP-1 and TIMP-2 secretion were detected by the method of ELISA; ColⅠ, ColⅢ, MMP-2 and MMP-9 and TIMP 1 and TIMP-2 mRNA expression were detected by real-time fluorescent quantitative PCR method. Results Compared with blank control group, Col Ⅰ, Col Ⅲ content and mRNA expression of Ang Ⅱ group increased (P ＜ 0.01). Compared with Ang Ⅱ group, Col Ⅰ, Col Ⅲ content and its mRNA of FZHY group expression decreased (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01). Compared with blank control group, MMP-2, MMP-9 and TIMP 1 and TIMP-2 and its mRNA expression of Ang Ⅱ group increased (P ＜ 0.05). MMP-2/TIMP-2 and MMP-9/TIMP-1 showed a decreasing trend. Compared with Ang Ⅱ group, MMP-2, MMP-9 and TIMP 1 and TIMP-2 and its mRNA expression, and its MMP-2/TIMP-2 of FZHY group decreased (P ＜ 0.05 or P ＜ 0.01), and MMP-9/TIMP-1 had a tendency to decrease, but there was no statistical significance (P > 0.05). Conclusion FZHY can reduce the CFs ColⅠ, ColⅢ expression, its mechanism may be related to downgrade MMP-2, MMP-9 and TIMP 1 and TIMP-2 and its mRNA expression, reduce the MMP-2/TIMP-2, MMP-9/TIMP-1 ratio, regulating the metabolism of ECM.

Key words： Fuzheng Huayu Recipe Myocardial fibrosis Myocardial fibroblast Extracellular matrix Metalloproteinase

基金资助:国家自然科学基金资助项目（81473662）。

通讯作者: 张冬梅（1975-），女，博士，研究员，博士生导师；研究方向：中西医结合临床心血管疾病应用基础。

作者简介: 朱珂（1993-），女，北京中医药大学东直门医院2016级中西医结合临床专业在读硕士研究生；研究方向：中西医结合临床心血管疾病应用基础。

引用本文:

朱珂1 娄利霞1 祁轶斐1,2 高永红1 李春红1 国倩倩1 吴丹丹1 张冬梅1. 从基质代谢角度探讨扶正化瘀方抗心肌纤维化的细胞分子机制[J]. 中国医药导报, 2019, 16(23): 12-15.
ZHU Ke1 LOU Lixia1 QI Yifei1,2 GAO Yonghong1 LI Chunhong1 GUO Qianqian1 WU Dandan1 ZHANG Dongmei1. Discussion on cellular and molecular mechanism of Fuzheng Huayu Recipe against myocardial fibrosis from the point of view of matrix metabolism. 中国医药导报, 2019, 16(23): 12-15.

链接本文:

http://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/ 或 http://www.yiyaodaobao.com.cn/CN/Y2019/V16/I23/12

[1] 朱锦星，凌望，程大雁，等.中药干预心脏成纤维细胞活化防治心肌纤维化研究进展[J].时珍国医国药，2018，29（8）：1971-1974.
[2] 马金，丁春华.心脏成纤维细胞与心肌纤维化[J].中华心血管病杂志，2014，42（3）：269-272.
[3] López B，González A，Díez J. Role of matrix metalloproteinases in hypertension-associated cardiac fibrosis [J]. Curr Opin Nephrol Hypertens，2004，13（2）：197-204.
[4] 马双陶，杨大春，唐兵，等.白藜芦醇抑制基质金属蛋白酶抗酒精性心肌纤维化[J].中国动脉硬化杂志，2012，20（1）：21-24.
[5] 祁轶斐，任学娇，娄利霞，等.FZHY对心肌梗死后心肌纤维化大鼠细胞外基质代谢的影响[J].中医杂志，2018， 59（7）：607-611.
[6] 任学娇，祁轶斐，娄利霞，等.FZHY对心肌梗死大鼠心肌纤维化及TGF-β1/Smads信号通路的影响[J].中西医结合心脑血管病杂志，2018，16（9）：1185-1189.
[7] 吴爱明，赵明镜，张冬梅，等.心梗后心力衰竭模型大鼠中医证候特点及心脏的超声评价[J].中国中西医结合杂志，2007，27（3）：227-230.
[8] 吴爱明，翟建英，张冬梅，等.扶正化瘀胶囊对心肌梗死大鼠心肌纤维化的影响[J].现代生物医学进展，2013，13（14）：2618-2621.
[9] 卓小桢，刘懿，李娜，等.白藜芦醇通过TGF-β1/Smad3信号通路抑制心肌成纤维细胞中AngⅡ诱导的Ⅰ/Ⅲ型胶原合成[J].西安交通大学学报：医学版，2018，39（4）：525-529，557.
[10] 于婷，王小梅.通心络对高糖培养下心肌成纤维细胞增殖和凋亡的影响[J].中国医科大学学报，2018，47（2）：132-136.
[11] Tang M，Zhong M，Shang Y，et al. Differential regulation of collagen typesⅠandⅢexpression in cardiac fibroblasts by AGEs through TRB3/MAPK signaling pathway [J]. Cell Mol Life Sci，2008，65（18）：2924-2932.
[12] Chi JY，Wang L，Zhang XH，et al. Activation of calcium-sensing receptor-mediated autophagy in angiotensinII-induced cardiac fibrosis in vitro [J]. Biochem. Biophys. Res. Commun.，2018，497（2）：571-576.
[13] 刘军锋，贾克刚，刘运德.基质金属蛋白酶与心脏重构及心肌病理损害的研究进展[J].中华老年心脑血管病杂志，2007，9（7）：499-500.
[14] 王娟，程志清.基质金属蛋白酶及其组织抑制剂与病毒性心肌炎心肌纤维化[J].中国心血管杂志，2007（06）：467-469.
[15] Trim JE，Samra SK，Arthur MJ，et al. Upstream tissue inhibitor of metalloproteinases-1 （TIMP-1） element-1，a novel and essential regulatory DNA motif in the human TIMP-1 gene promoter，directly interacts with a 30-kDa nuclear protein [J]. J Biol Chem，2000，275（9）：6657-6663.
[16] 陈漫天，魏盟.心室重构中细胞外基质合成与降解失平衡的研究进展[J].同济大学学报：医学版，2004，25（3）：261-264.
[17] Briest W，H?觟lzl A，Rassler B，et al. Significance of matrix metalloproteinases in norepinephrine-induced remodelling of rat hearts [J]. Cardiovasc Res，2003，57（2）：379-387.
[18] Dong J，Gao C，Liu J，et al. TSH inhibits SERCA2a and thePKA/PLN pathway in rat cardiomyocytes [J]. Oncotarget，2016，7（26）：39 207-39 215.
[19] Gao C，Li T，Liu J，et al. Endothelial Functioning and HemodynamicParameters in Rats with Subclinical Hypothyroid and the Effects ofThyroxine Replacement [J]. PLoS One，2015，10（7）：1-14.
[20] Fan D，Takawale A，Basu R，et al. Differential role of TIMP2 and TIMP3 in cardiac hypertrophy，fibrosis and diastolic dysfunction [J]. Cardiovasc Res，2014，103（2）：268-280.
[21] 刘焱，刘刚，刘坤申.基质金属蛋白酶抑制剂与心脏疾病[J].临床荟萃，2005，20（16）：953-955.